واتس اپ

8618237112626

ELISA Microplate Reader چیست؟

Dec 15, 2016 پیام بگذارید

میکروپلیت ریدر الایزا چیست؟

Elisa Microplate Reader (7)

میکروپلیت ریدر، یعنی سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم، ابزار ویژه ای برای سنجش ایمونوسوربنت متصل به آنزیم است. در واقع این یک رنگ سنج یا اسپکتروفتومتر فوتوالکتریک ویژه است و اصل کار آن اساساً همان ساختار اصلی و رنگ سنج فوتوالکتریک است. به سادگی می توان آن را به دو دسته نیمه اتوماتیک و تمام اتوماتیک تقسیم کرد، اما اصول کار آنها اساسا یکسان است. هسته آن یک رنگ سنج است، یعنی از روش رنگ سنجی برای تجزیه و تحلیل محتوای آنتی ژن یا آنتی بادی استفاده می شود. تعیین الایزا به طور کلی نیاز به حجم نهایی محلول تست دارد که کمتر از 250μL باشد و آزمایش را نمی توان با رنگ سنج فوتوالکتریک عمومی تکمیل کرد، بنابراین شرایط خاصی برای رنگ سنج فوتوالکتریک در میکروپلیت خوان وجود دارد.


اصل

میکروپلیت خوان در واقع یک رنگ سنج فتوالکتریک یا اسپکتروفتومتر با کاربرد خاص است و اصول اولیه کار آن اساساً همان ساختار اصلی و رنگ سنج فوتوالکتریک است. شکل، کار یک دستگاه میکروپلیت خوان خودکار نمونه برداری تک کاناله را نشان می دهد. نمودار شماتیک. موج نوری ساطع شده توسط لامپ منبع نور توسط فیلتر یا تک رنگ به نور تک رنگ تبدیل می شود و در قطب میکرو متخلخل پلاستیکی وارد نمونه تحت آزمایش می شود. بخشی از نور تک رنگ توسط نمونه جذب می‌شود و بخشی دیگر از طریق نمونه منتقل می‌شود و به ردیاب نوری روشن می‌شود، ردیاب نوری سیگنال‌های نوری مختلف نمونه را برای آزمایش به سیگنال‌های الکتریکی مربوطه تبدیل می‌کند. سیگنال های الکتریکی با تقویت پیش تقویت، تقویت لگاریتمی و تبدیل آنالوگ به دیجیتال پردازش می شوند. برای پردازش و محاسبه داده ها وارد ریزپردازنده شوید و در نهایت نتایج را توسط نمایشگر و چاپگر نمایش دهید. ریزپردازنده همچنین حرکت مکانیسم درایو مکانیکی را در جهت X و جهت Y کنترل می‌کند تا میکروپلیت را در مدار کنترل حرکت دهد تا فرآیند تشخیص نمونه‌برداری خودکار محقق شود. سایر میکروپلیت‌خوان‌ها از حرکت دستی میکروپلیت برای تشخیص استفاده می‌کنند، بنابراین مکانیسم مکانیکی درایو و مدار کنترل در جهت‌های X و Y حذف می‌شوند، بنابراین ابزار کوچک‌تر و ساختار ساده‌تر می‌شود.


میکروپلیت یک صفحه پلاستیکی شفاف است که مخصوصاً برای قرار دادن نمونه مورد آزمایش استفاده می شود. صفحه دارای چندین ردیف سوراخ کوچک با اندازه یکنواخت است و آنتی ژن یا آنتی بادی مربوطه در سوراخ تعبیه شده است. هر سوراخ کوچک می تواند چند ده میلی لیتر محلول را در خود جای دهد.


نور یک موج الکترومغناطیسی است. طول موج 100 تا 400 نانومتر را نور فرابنفش، نور بین 400 تا 780 نانومتر را می توان با چشم انسان مشاهده کرد و طول موج بیش از 780 نانومتر را نور مادون قرمز می نامند. مردم فقط می توانند رنگ ها را ببینند زیرا نور به جسم برخورد می کند و توسط شی منعکس می شود. گیاهان سبز سبز هستند زیرا بیشتر گیاهان نور قرمز-نارنجی و نور آبی-بنفش را جذب می کنند، اما سبز را جذب و منعکس نمی کنند، بنابراین گیاهان سبز به نظر می رسند. اصل اندازه گیری میکروپلیت خوان تشخیص جذب آنالیت در یک طول موج خاص است.



ساختار

صفحات 40 چاهی، صفحات 55 چاهی، صفحات 96 چاهی و غیره وجود دارد. ابزارهای مختلف از صفحات دهانه متفاوتی استفاده می کنند که می توان آنها را یک به یک یا ردیف به ردیف آزمایش کرد.


نور تک رنگ مورد استفاده توسط میکروپلیت خوان را می توان از طریق یک فیلتر منسجم یا همان تک رنگ اسپکتروفتومتر به دست آورد. هنگام استفاده از فیلتر به عنوان دستگاه فیلتر، همان رنگ سنج معمولی است. می توان آن را در جلوی میکروپلیت یا پشت میکروپلیت قرار داد. پس از کندانسور، دیافراگم به بازتابنده می رسد، توسط بازتابنده در 90 درجه منعکس می شود و از محلول رنگ سنجی به صورت عمودی عبور می کند و سپس از طریق فیلتر ارسال می شود. به فتوسل


از نمودار بلوک کار و نمودار مسیر نور دستگاه میکروپلیت خوان می توان دریافت که تفاوت های زیر را با رنگ سنج های فوتوالکتریک معمولی دارد:


(L) ظرف محلول رنگ سنجی مورد آزمایش دیگر از یک کووت استفاده نمی کند، بلکه از یک میکروپلیت پلاستیکی استفاده می کند. میکروپلیت معمولاً از مواد پلی اتیلن شفاف ساخته می شود که اثر جذب قوی روی آنتی ژن و آنتی بادی دارد، بنابراین از آن به عنوان یک حامل فاز جامد استفاده می شود.


⑵از آنجایی که میکروپلیت پلاستیکی حاوی نمونه متخلخل چند ردیفه است، نور فقط می تواند به صورت عمودی از آن عبور کند، بنابراین پرتو نور دستگاه میکروپلیت خوان از محلول مورد آزمایش و میکروپلیت به صورت عمودی عبور می کند. پرتو نور می تواند از بالا به پایین باشد یا می تواند از طریق مایع رنگ سنجی از پایین به بالا عبور کند.


⑶ میکروپلیت خوان ها معمولا نه تنها از A استفاده می کنند، بلکه گاهی اوقات از OD با چگالی نوری نیز برای بیان جذب استفاده می کنند. میکروپلیت خوان ها به دو نوع تک کاناله و چند کاناله و تک کاناله به دو نوع اتوماتیک و دستی تقسیم می شوند. نوع اتوماتیک ابزار مکانیزم محرک مکانیکی در جهت X و Y وجود دارد که می تواند سوراخ های کوچک میکروپلیت L را یکی یکی زیر پرتو برای تست بفرستد و نوع دستی از حرکت دستی میکروپلیت برای اندازه گیری استفاده می کند.


بر اساس خواننده میکروپلیت تک کانالی، خواننده میکروپلیت چند کاناله توسعه یافته است. این نوع از میکروپلیت خوان عموماً خودکار است. دارای پرتوهای متعدد و ردیاب های نوری متعدد، مانند ابزار 12 کانالی با 12 پرتو یا 12 منبع نور، 12 آشکارساز و 12 تقویت کننده، تحت عمل دستگاه درایو مکانیکی در جهت X، 12 نمونه در یک ردیف سرعت تشخیص میکروپلیت خوان چند کاناله سریع است، اما ساختار آن قیمت های پیچیده تر نیز بالاتر است.


محدوده کاربرد میکروپلیت خوان

تست هماتولوژی تست آنتی بادی مرتبط با پلاکت PAIgA، PAIgG، PAIgM


تعیین D-Dimer D-Dimer


تعیین محصولات تجزیه فیبرین سرم FDP


تعیین T3، T4 با تری یدوتیرونین و تترایدوتیرونین


تست ایمونولوژیک CRP تعیین پروتئین واکنشی C


تعیین ایمونوگلوبولین IgD، IgE


تعیین کمپلکس های ایمنی در گردش CIC


تعیین فاکتور روماتوئید IgG، IgA، IgM RF


آنتی بادی ضد تیروگلوبولین، تعیین آنتی بادی میکروزومی TG، TM


تشخیص ایمونولوژیک سرطان تومور تعیین آلفا فتوپروتئین AFP


تعیین آنتی ژن کارسینومبریونیک CEA


تعیین آنتی ژن اختصاصی پروستات PSA


تعیین سرطان پانکراس، سرطان مجاری صفراوی، سرطان معده CA19-9


تعیین سرطان تخمدان CA125


تعیین سرطان سینه CA15-3


تعیین کارسینوم سلول سنگفرشی دهانه رحم SCC


تشخیص سرطان چندگانه مغز استخوان


تعیین hTG سرطان تیروئید


تست ایمونولوژیک بیماری عفونی، تست سرولوژیک هپاتیت A، آنتی HAV-IgM


تست سرولوژی هپاتیت B دو و نیم جفت


تشخیص سرولوژی هپاتیت C Anti-HAV-IgG، anti-HCV-IgM


تشخیص سرولوژیک هپاتیت D Anti-HDV-IgG، anti-HDV-IgM


تشخیص سرولوژیکی هپاتیت E Anti-HEV-IgG


تشخیص آنتی بادی برای تب خونریزی دهنده با سندرم کلیوی HFRS-IgG


تشخیص آنتی بادی IgM ویروس آنسفالیت ژاپنی


تشخیص آنتی بادی های ویروس نقص ایمنی انسانی (یعنی ایدز منطقه ای) HIV β 2 M


تست عملکرد مراقبت های دوران بارداری و پس از زایمان تست توکسوپلاسما ویروس TOXO


RV تشخیص ویروس سرخجه


تشخیص سیتومگالوویروس CMV


تشخیص ویروس هرپس سیمپلکس Anti-HSV (Ⅰ, Ⅱ)


دیگران همچنین می توانند آزمایش های ژنتیکی و بقایای حیوانی، موارد بازرسی باقی مانده آفت کش ها و غیره را انجام دهند.