پنج طبقه بندی فناوری سلول های خونی ، کاربردی جامع در زمینه اپتیک ، مکانیک ، مکانیک سیالات ، رایانه های الکترونیکی ، زیست شناسی سلولی ، ایمونولوژی و سایر رشته ها است. این اجازه می دهد تا محلول اندازه گیری شده در منطقه اندازه گیری جریان یابد و خصوصیات فیزیکی و شیمیایی هر سلول را یکی یکی تشخیص دهد. روشی برای تعیین و تجزیه و تحلیل کمی سریع سلولهای با سرعت بالا یا سلولهای فرعی. این می تواند هزاران سلول را در یک ثانیه تجزیه و تحلیل کند و همزمان چندین پارامتر سلول را اندازه گیری کند. از روش امپدانس نیز در آنالیزور پنج کلاسه خون ، به اصطلاح روش امپدانس جریان غلاف استفاده می شود.
در پیشخوان سلول های خونی متداول ، سلول های قرمز خون (RBC) و پلاکت ها (PLT) دارای یک کانال اندازه گیری هستند و اصل اندازه گیری میزان هموگلوبین (HGB) در هر نوع و درجه سازه یکسان است. یک کانال اختصاصی برای شمارش و طبقه بندی گلبولهای سفید وجود دارد. اکنون ما به طور خلاصه روش ها و اصول فنی مورد استفاده در هر مورد از آزمون را در آنالیزور معرفی خواهیم کرد.
1. تعیین میزان هموگلوبین
تعیین میزان هموگلوبین افزودن یک ماده همولیتیک به خون رقیق شده برای آزاد سازی هموگلوبین از گلبول های قرمز خون است. دومی با عامل همولیتیک ترکیب شده و مشتقی از هموگلوبین را تشکیل می دهد ، که وارد سیستم آزمایش هموگلوبین می شود و آن را در یک طول موج خاص (معمولاً 530-550 نانومتر) مقایسه می کند. تغییر رنگ و جذب متناسب با مقدار Hb موجود در مایع است و دستگاه می تواند غلظت Hb را نمایش دهد.
سری های مختلف آنالیز کننده های خون فرمول های مختلفی برای حمایت از عوامل همولیتیک دارند و مشتقات هموگلوبین تشکیل شده نیز متفاوت هستند ، اما بیشتر طیف های جذب حداکثر نزدیک به 540 نانومتر هستند. در سال های اخیر ، بسیاری از تجزیه و تحلیل گران بالا روش پراکندگی نور لیزر را برای تجزیه و تحلیل تک هموگلوبین گلبول های قرمز خون در پیش گرفته اند تا تأثیر WBC بالا ، گلبول قرمز ، بیلی روبین بالا و غیره را در رنگ سنجی HBG کاهش دهند.
2. تشخیص گلبول های قرمز و پلاکت ها
تشخیص گلبول های قرمز خون قسمت مهمی در آنالیز خون است. در گذشته ، تشخیص گلبول های قرمز عمدتا از روش امپدانس برای شمارش تعداد و حجم گلبول های قرمز خون برای مرتب سازی سیگنال ها در اندازه های مختلف و چاپ هیستوگرام توزیع حجم گلبول های قرمز استفاده می شد. با این حال ، برای انجام تجزیه و تحلیل سه بعدی (3D) بر روی حجم گلبول های قرمز خون ، به منظور دستیابی به نتایج دقیق تر ، از ترکیبی از امپدانس نوری و نوری استفاده شده است.
به عنوان مثال ، ADVIA 120 Bayer از پراکندگی نور برای تشخیص گلبول های قرمز خون استفاده می کند و از دو سیستم اندازه گیری پراکنده نور جلو و زاویه بالا و پراکندگی زاویه بالا برای اندازه گیری 1 گلبول قرمز به طور همزمان و اندازه گیری حجم و تعداد کل یک گلبول قرمز واحد با توجه به اندازه انرژی تبدیل نور با زاویه کم ؛ پراکندگی نور با زاویه بالا می تواند غلظت هموگلوبین منفرد بدست آورد که می تواند مقادیر اندازه گیری MCV (متوسط حجم گلبول قرمز) ، MCH (متوسط هموگلوبین) ، MCHC (غلظت متوسط هموگلوبین) را بدست آورد و نمودارهای پراکندگی گلبول های قرمز ، قرمز منفرد را بدست آورد. حجم گلبول های خون و گلبول های قرمز هیستوگرام محتوای Hb داخلی و محاسبه پارامترهایی مانند RWD (عرض توزیع حجم گلبول های قرمز) ، HDW (عرض توزیع هموگلوبین گلبول های قرمز).
با توجه به تفاوت آشکار در حجم پلاکت ها و گلبول های قرمز ، تشخیص سیگنال های فوتوالکتریک به طور همزمان توسط این دو با یک آستانه محدود آسان است. بنابراین ، تا کنون ، یک سیستم تجزیه و تحلیل مشترک برای آزمایش پلاکت و گلبول قرمز در تجزیه و تحلیل خون کامل استفاده شده است. با این حال ، سیگنال های اندازه گیری پلاکت ها و گلبول های قرمز اغلب عبور می کنند. به عنوان مثال ، ممکن است سیگنال نبض پلاکت های بزرگ با گلبول های قرمز خون اشتباه گرفته شده و شمارش شود ، و سیگنال نبض گلبول های قرمز کوچک ممکن است وارد کانال پلاکت شود و باعث اشتباهات آزمایشی شود. تولید کنندگان مختلف آنالیز کننده خون ، از انواع فن آوری های پیشرفته برای کاهش تداخل در تعداد پلاکت ها مانند فناوری جریان رفت و برگشت استفاده می کنند.
فناوری جریان رفت و برگشت (جریان رفت و برگشت): از آنجایی که پلاکت ها و گلبول های قرمز در یک سلول شمارش کننده شمارش می شوند ، اندازه گلبول های قرمز خون بزرگ است و هنگام عبور از منطقه القایی شمارش مرکزی ، نبض بزرگی تشکیل می دهند. اگر جریان برگشتی وجود داشته باشد ، به دلیل جریان گردابی ، ورود مجدد نیز ایجاد می شود. پالس کوچک تشکیل شده در لبه ناحیه سنجش این امکان را برای الکترود ایجاد می کند که یک پالس کوچک معادل اندازه پلاکت ها را حس کند ، که به دروغ افزایش می یابد تعداد پلاکت فن آوری جریان رفت و برگشت این است که همزمان گلبول های قرمز و پلاکت ها را شمارش کنید ، جریان مایع پایداری در پشت سوراخ شمارش گلبول های قرمز وجود دارد ، به طوری که گلبول های قرمز می توانند بلافاصله شسته شوند تا از بازگشت به منطقه القایی جلوگیری شود به عنوان پلاکت شمرده می شود.
